求助DAPI荧光染料的使用方法

求助DAPI荧光染料的使用方法

下文摘自索莱宝技术文章
GelRed 是一种高灵敏、低毒性和超安全的荧光核酸凝胶染色试剂。它可替代溴化乙锭（EB），并且远高于EB的灵敏度，同时不需要脱色。由于GelRed和EB有相同的光谱特性，因此用它替代EB时不需要更换成像系统。GelRed既可用于预制凝胶也可用于电泳后染色。通常电泳后染色的灵敏度更高，并能排除染料对DNA迁移的干扰 。使用 GelRed进行电泳后染色，操作简单，不需要脱色和特殊溶液。只要将染料稀释在 0.1M NaCl 中，并将凝胶置于染色液中， 30 分钟后就可以观察。染色液在室温下极为稳定，可以多次反复使用。相比而言，预制凝胶由于不需要额外染色过程，因此染料用量更少，更为简单经济。
GelRed核酸染料的特点：
Gelred其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。
重要提示：
1、无 毒 性：GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明，该染料的诱变性远小于EB。其水溶染色剂通过美国环保局安全认定，废弃物可直接倒入下水道，而不会造成任何环境污染。
2、灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
3、稳定性高： 可以使用微波炉加热，可以在室温下保存。
4、信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。
5、操作简单：与 EB 一样，在预制胶和电泳过程中不必担心染料降解；而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ，即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
6、适用范围广：适用于预制凝胶（胶染法）和凝胶电泳后染色（泡染法）。
7、与标准凝胶成像系统完美兼容 ：使用 312nm 激发的 UV 凝胶成像系统时， GelRed 可以完美的替代 EB。

使用方法：（仅供参考） 1， 固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行 dapi 染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行 dapi 染色。 2， 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 dapi 染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。 3， 室温染色 5-10 分钟。 4， 吸除 dapi 染色液，用 tbst、pbs 或生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。 5， 置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。 dapi 溶液注意事项： dapi 被普遍认为具有致癌性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。 本产品需避光，并尽量避免反复冻融。 荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂